Extraneural Pathologic Prion Protein in Sporadic Creutzfeldt-Jakob Disease cd

Reakcja łańcuchowa polimerazy i analiza całego regionu kodującego genu białka prionowego (PRNP) zostały przeprowadzone przy użyciu standardowych technik i oprogramowania (SeqScape, Applied Biosystems). Ponadto, polimorfizmy kodonu 129 zidentyfikowano za pomocą analizy polimorfizmu długości fragmentów restrykcyjnych.17 Analiza histologiczna
Tkanka została utrwalona 4-procentową buforowaną formaliną, unieczynnioną przez ekspozycję na 98% kwasu mrówkowego przez jedną godzinę i zatopioną w parafinie. Skrawki (3 .m) poddano konwencjonalnemu barwieniu i barwieniu immunologicznemu pod kątem białka glialowego kwasu fibrylarnego (Dako) i PrP (monoklonalne przeciwciało 3F4) po autoklawowaniu hydrolitycznym.
Wyniki
Przeanalizowaliśmy łącznie 45 próbek śledziony i 51 próbek mięśni szkieletowych od 36 pacjentów z histopatologicznie, biochemicznie i genetycznie potwierdzoną sporadyczną chorobą Creutzfeldta-Jakoba (średnia [. SD] wieku, 66,8 . 8,7 lat, 20 mężczyzn i 16 kobiet); 10 pacjentów z chorobą Alzheimera (średni wiek, 76,2 . 4,6 lat, 6 mężczyzn i 4 kobiety); i 9 pacjentów bez choroby neurologicznej (średni wiek, 59 . 19,2 roku, 5 mężczyzn i 4 kobiety). Rozkład wieku, stosunek płci i czas trwania choroby (średnia, 5,0 . 4,6 miesiąca) w kohorcie pacjentów ze sporadyczną chorobą Creutzfeldta-Jakoba nie różniły się istotnie od opublikowanych serii.18
Nagromadzenie PrPSc w śledzionie i mięśniu szkieletowym
Rycina 1. Rycina 1. Analiza Western Blot wytrąconego z Phosphotungstate patologicznego białka prionowego (PrPSc) ze śledziony i próbek mięśni od pacjentów ze sporadyczną chorobą Creutzfeldta-Jakoba (sCJD). Ścieżki i 2 przedstawiają analizę Western blot (całkowite białko) 50 .g homogenatu mózgu od pacjenta bez choroby Creutzfeldta-Jakoba. Ścieżki 3 i 4 pokazują homogenat mózgowy od pacjenta ze sporadyczną chorobą Creutzfeldta-Jakoba rozcieńczoną homogenatem śledziony od pacjenta bez choroby prionowej (kontrola); ścieżki 5 i 6 homogenatu mózgu z kontroli rozcieńczonej homogenatem śledziony z kontrolnej; ścieżki 7 i 8 homogenatu śledziony od pacjenta ze sporadyczną chorobą Creutzfeldta-Jakoba; oraz ścieżki 9, 10, 11, 12 i 13 homogenatu mięśni od pacjenta ze sporadyczną chorobą Creutzfeldta-Jakoba. PrPSc występuje w dwóch próbkach (ścieżki 7 i 10). Ścieżki 2, 4 i 6 do 13 pokazują wyniki po trawieniu proteinazą K.
Tabela 1. Tabela 1. Wiek przy początku i czasie trwania choroby u 15 pacjentów ze sporadyczną chorobą Creutzfeldta-Jakoba i białkiem Prologc z zewnątrznaczyniowym patogenem (PrPSc). Analiza Western blot białek prionowych opornych na proteazę po wytrącaniu fosforo-fosforanem wykazała PrPSc w 10 z 28 próbek śledziony i 8 z 32 próbek mięśni szkieletowych od pacjentów ze sporadyczną chorobą Creutzfeldta-Jakoba (Figura 1). Trzech pacjentów miało PrPSc zarówno w śledzionie, jak iw mięśniach (tabela 1). Testy powtórzono z niezależnie homogenizowanymi fragmentami tkanki: trzy śledziona i trzy próbki mięśniowe zawsze były pozytywne, podczas gdy inne dały zmienne wyniki (Tabela 1), prawdopodobnie z powodu niejednorodnego obwodowego rozkładu PrPSc, jak opisano poprzednio.
Tabela 2. Tabela 2. Charakterystyka demograficzna i klasyfikacja sporadycznej choroby Creutzfeldta-Jakoba u pacjentów z patologicznym białkiem prionowym (PrPSc) w śledzionie i próbkach mięśni
[hasła pokrewne: dietetyk kraków cena, myconolak cena, staw barkowo obojczykowy ruchy ]
[hasła pokrewne: myconolak cena, olx ozorków, rezonans magnetyczny kręgosłupa cena ]